同时还探讨了 TBK1 对 LSS 诱导的 Akt 激活的影响。结果表明，LSS 诱导的 Akt 激活并不需要TBK1。总之，这些数据表明 IKKε，而不是 TBK1，与 Akt 相互作用，并作为响应 LSS 的 Akt 的关键上游激活剂发挥作用。
为了阐明 Akt 在 LSS 诱导的内皮功能障碍中的作用，实验检测了 Akt 抑制对 LSS 诱导的 HUVECs 中 ICAM-1 表达的影响。与对照组（DMSO，1:10000）相比，在静态组和 LSS 组，1 μM 浓度的特异性 Akt 抑制剂 MK2206 可阻断 Akt（Ser473 和 Thr308）的磷酸化。值得注意的是，在用 MK2206 处理的 HUVECs 中，由 LSS 触发的 ICAM-1 的蛋白表达显著降低。
接下来进一步证明 Akt 激活对 LSS 刺激的 ICAM-1 表达的影响，结果表明，Akt1 失活突变显著降低了 LSS 诱导的 ICAM-1 表达。此外，MK2206 对 Akt 的抑制显著降低了 LSS 诱导的 ICAM-1、VCAM-1 和 MCP-1 的 mRNA 表达水平。更重要的是，AAV 介导的内皮特异性 Akt1 过表达显著增加了小鼠部分结扎的颈动脉 LSS 区域的内膜 ICAM-1 表达。所有这些结果都反映了 Akt 参与了 LSS 诱导的 ECs 中粘附分子和趋化因子的表达。为了确定响应 LSS 的 Akt 激活介导的 ICAM-1 表达机制，实验最后检测了 Akt 抑制对 IRF3、NF-κB 和 STAT1 的影响，它们都是 IKKε 的关键下游分子并参与 ICAM-I表达 。与对照组（DMSO，1:10000）相比，MK2206 对 Akt 的抑制显著消除了 LSS 诱导的 IRF3 磷酸化和核易位。同样，Akt1 失活突变显著减少了 LSS 诱导的 IRF3 核易位。此外，AAV 介导的 Akt1 过表达显著上调小鼠部分结扎的颈动脉 LSS 区域的内膜 IRF3 表达。相比之下，MK2206 对 Akt 的抑制对 LSS 刺激的 NF-κB 和 STAT1 的磷酸化和核易位没有影响。这些结果表明 Akt 通过激活 IRF3 而不是 NF-κB 和 STAT1 来促进 LSS 诱导的 ICAM-1 表达。
LSS 在 HUVECs 中激活的 IKKε/Akt/IRF3 信号通路的表征。IKKε 介导的 Akt Ser473 和 Thr308 位点的磷酸化通过增加 IRF3 磷酸化和核易位以及随后与 ICAM-1 启动子结合以响应 LSS 来促进 ICAM-1 表达。总之，该研究表明 LSS 诱导的 Akt 磷酸化依赖于 IKKε，并通过激活 IRF3 促进内皮炎症。这些发现为 LSS 诱导的病理过程提供了一种新机制，并为针对动脉粥样硬化，特别是血管分叉病变中炎症性疾病的新疗法提供了新的见解。
参考文献：Zhu L, Yang H, Chao Y, Gu Y, Zhang J, Wang F, Yu W, Ye P, Chu P, Kong X, Chen S. Akt phosphorylation regulated by IKKε in response to low shear stress leads to endothelial inflammation via activating IRF3. Cell Signal. 2021 Apr;80:109900. doi: 10.1016/j.cellsig.2020.109900. Epub 2020 Dec 25. PMID: 33370582.原文链接：https://pubmed-ncbi-nlm-nih-gov.proxy.library.carleton.ca/33370582/小编旨在分享、学习、交流生物科学等领域的研究进展。如有侵权或引文不当请联系小编修正。如有任何的想法以及建议，欢迎联系小编。了解更好科研资讯欢迎关注公众号Naturethink!
